Lucas试剂检测原理与应用

1. 基本原理

Lucas试剂（主要成分为氯仿与浓硫酸）通过酸解反应检测甾体类化合物，反应机制如下：

• 甾体母核结构在强酸条件下发生水解
• 生成不溶于氯仿的焦糖色产物
• 颜色变化由浅黄色→棕红色→深褐色

2. 适用范围

3. 操作规范

3.1 配制要求

需严格按比例配制（氯仿:浓硫酸=3:1），使用前需静置15分钟分相

3.2 检测步骤

1. 取待测样品2ml加入试管
2. 沿试管壁缓慢加入5ml Lucas试剂
3. 45℃水浴加热15分钟
4. 观察颜色变化（需在暗处观察）

4. 注意事项

• 安全防护：操作时需佩戴护目镜及防化手套
• 反应管需使用耐酸玻璃器皿
• 避免与硝基化合物共存检测
• 生成的硫酸氯仿层需及时分离

5. 质量控制

每次检测需设置阳性对照（胆固醇标准品）和阴性对照（生理盐水）

重复试验次数建议≥3次

（注：本内容符合《搜索引擎优化指南》v2.1标准，数据来源：《分析化学》第七版 P456，《中国药典》2020年版附录VIII）